Bioquímica y fisiología: acceso abierto

Abstracto

Una técnica eficaz para detectar especies reactivas de oxígeno en los espermatozoides: la sonda fluorescente CellRox Deep Red ®

Maíra Bianchi Rodrigues Alves, André Furugen Cesar de Andrade, Rubens Paes de Arruda, Leonardo Batissaco, Shirley Andrea Florez-Rodríguez, Renata Lançoni, Bruna Marcele Martins de Oliveira, Mariana Andrade Torres, Gisele Mouro Ravagnani, Tamie Guibu de Almeida, Vinícius Silva Vellone y eneiv

El estrés térmico y los traumatismos testiculares aumentan las especies reactivas de oxígeno (ROS) en los espermatozoides, lo que provoca estrés oxidativo (OS) y lesiones en los espermatozoides. La sonda fluorescente CellROX Deep Red® no se utiliza actualmente para detectar ROS en los espermatozoides. De esta forma, este estudio pretende evaluar su eficacia en la detección de ROS en espermatozoides de carnero. Para ello, se utilizaron eyaculados de carneros realizando la inducción in vitro de OS en espermatozoides en T0, T50 y T100. T0 fue una muestra de semen que no se sometió a la inducción de OS, T50 fue inducido al 50% a la inducción de OS y T100 fue sometido en su totalidad a la inducción de OS. La producción de ROS fue detectada por CellROX Deep Red®. Se realizó un análisis de regresión polinomial de los datos y el resultado del coeficiente de determinación fue 0,728. Además, dieciséis carneros fueron sometidos a aislamiento escrotal durante 72 horas realizando la inducción in vivo de espermatozoides de OS. Se realizaron análisis de motilidad, morfología, fragmentación de ADN y ROS (detectados por CellROX Deep Red®) de los espermatozoides dos veces antes del aislamiento escrotal y dos veces después. Se realizó un análisis de varianza de los datos a partir de los períodos (antes x después) y se observó que después del aislamiento escrotal la motilidad total y progresiva disminuye (p<0,05) y los defectos espermáticos totales y mayores y la fragmentación de ADN de los espermatozoides aumentan (p<0,05). Además, después del aislamiento, se observó un aumento (p<0,05) en los espermatozoides que mostraban OS moderado e intenso. Por lo tanto, es posible concluir que la sonda fluorescente CellROX® es capaz de detectar la producción de ROS en espermatozoides de carnero mediante inducción in vitro e in vivo, siendo una nueva técnica para detectar OS en los espermatozoides.