Revista de técnicas analíticas y bioanalíticas

Abstracto

Efecto de la temperatura, longitud de onda, pH, reactivos de pares iónicos y concentración de modificadores orgánicos en la elución de cistatina C. Estabilidad de la fase móvil

Manar Khalid Fayyad, Adel Khalil Misha y Othman Ibrahem Yousef Al-Musaimi

Se ha verificado la robustez de un método cromatográfico analítico para la separación de cistatina c. Se llevaron a cabo cambios en muchos parámetros, como longitud de onda, horno de columna, composición de la fase móvil y columna cromatográfica.

Los cambios imperativos han alterado la eficiencia de la separación cromatográfica; dichos cambios incluyen la alteración del pH de la fase móvil, así como el cambio de la molaridad del sulfonato de alquilo.

Todas las condiciones de robustez no mostraron un efecto importante en la separación cromatográfica del analito, excepto con los cambios relacionados con el TFA y los reactivos de pares iónicos de sulfonato de alquilo. La desviación estándar relativa del área de pico, la asimetría y el número de platos teóricos fueron < 0,7 %, < 1,2 y > 10 000, respectivamente. Los resultados obtenidos utilizando la fase móvil después de 6 meses de almacenamiento han demostrado su estabilidad y posibilidad de uso. Se utilizó el modo de elución en gradiente para eluir la cistatina c con una detección UV de 224 nm. Se utilizaron Ace y Waters C8 (150 x 4,6 mm de diámetro interior, 5 μm) como columnas cromatográficas.