Revista de técnicas analíticas y bioanalíticas

Abstracto

Identificación y reducción de los efectos de matriz provocados por el solutol HS15 en bioanálisis mediante cromatografía líquida/espectrometría de masas en tándem

Vijaya Bhaskar V, Anil Middha, Sudhir Tiwari y Savithiri Shivakumar

Se estudió el efecto de supresión iónica del excipiente vehículo de dosificación Solutol HS15 (SHS15) sobre la precisión de las mediciones de cromatografía líquida /espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS). La supresión iónica causa errores significativos en la precisión de las concentraciones medidas de los compuestos de prueba, invalidando así la evaluación de los resultados farmacocinéticos. Utilizando SHS15 como compuesto de prueba, se determinó el perfil de concentración-tiempo del excipiente en plasma de ratas dosificadas tanto por vía oral como intravenosa. Se identificaron un total de doce oligómeros para SHS15. Los iones más abundantes correspondientes a oligómeros SHS15  a t m/z 481, 525, 569, 613, 657, 701, 745, 789, 833, 877, 921, 965 se seleccionaron para el monitoreo de reacción pseudomúltiple (pMRM) en modo de ionización por electrospray. El área de pico de analito de los oligómeros se sumó para calcular las concentraciones plasmáticas de SHS15 total. Las concentraciones plasmáticas de SHS15 que oscilaban entre 1 y 2 mg/ml en los puntos de muestreo iniciales provocaron una supresión iónica de 2 a 10 veces en la mayoría de los analitos estudiados. Esto puede dar lugar a un falso rechazo de compuestos en una prueba de descubrimiento de fármacos. Se investigaron varios métodos de preparación de muestras, selectividad cromatográfica mejorada y métodos de ionización alternativos como medios para evitar o minimizar los efectos de supresión iónica. La eliminación de los efectos de supresión iónica se logró mediante extracción líquido-líquido ( LLE ) con hexano, éter terc-butil-metil (TBME) como método de preparación de muestras. Se propuso el mecanismo de supresión iónica causada por SHS15 en relación con las reacciones en fase líquida y gaseosa.