Biología celular y molecular

Abstracto

Aislamiento y validación in vitro de promotores específicos del músculo cardíaco en cerdos

Sangsu Shin, Jinsoo Ahn1, Yeunsu Suh, Steven J. Moeller, Seongsoo Hwang y Kichoon Lee

La identificación de secuencias promotoras que pueden impulsar la expresión específica del corazón de transgenes es esencial para investigar la función de los genes en el corazón. El objetivo de este estudio fue identificar genes específicos del corazón y sus secuencias promotoras que pueden promover la expresión de transgenes específicos del corazón en células cardíacas primarias de cerdo. Los perfiles de expresión génica en el repositorio Gene Expression Omnibus (GEO) se han integrado y utilizado para identificar MYH6, TNNI3 y MYBPC3 como genes comunes específicos del corazón en el ratón y el ser humano. La RT-PCR confirmó además la expresión específica del corazón de los genes entre varios tejidos en cerdos, así como en ratones y seres humanos. El análisis bioinformático predijo que sus secuencias promotoras contienen múltiples sitios de unión para factores de transcripción involucrados en la cardiogénesis y las secuencias promotoras se conservaron sustancialmente entre cerdos y seres humanos. Además, el análisis in vitro mostró que la expresión del gen reportero (es decir, la proteína de fluorescencia verde (GFP)) bajo la regulación de las secuencias promotoras de MYH6, TNNI3 y MYBPC3 se detectó en células cardíacas primarias de cerdo, pero no en otras células primarias. Estos hallazgos, junto con las similitudes fisiológicas entre humanos y cerdos, sugieren que estos nuevos promotores pueden ser candidatos valiosos para la regulación de la expresión de genes cardíacos tanto en humanos como en cerdos con fines biomédicos.