Biología celular y molecular

Abstracto

El miR-148a regulado transcripcionalmente por ZEB1 suprime la proliferación de células de la papila dérmica y promueve la apoptosis celular a través del eje FGF7/MAPK.

Bai-He Wang, Fan Wu, Jie Zhang, Sheng-Nan Wang, Yuan-Yuan Li

Antecedentes: La alopecia areata (AA) es una enfermedad autoinmune específica del folículo piloso. Las células de la papila dérmica (PD) desempeñan papeles clave en el desarrollo y crecimiento de los folículos pilosos. Los microARN (miARN) están estrechamente relacionados con las actividades celulares de las células de la EP. En este trabajo, investigamos la función del miR-148a en la regulación de las actividades celulares de las células de la PD.

Métodos: Se evaluaron las expresiones de ARNm y proteínas mediante qRT-PCR y Western blot. La proliferación de células DP se evaluó mediante ensayos MTT y EdU. Además, se evaluó la apoptosis celular utilizando un citómetro de flujo. Finalmente, se realizó un ensayo de doble luciferasa para verificar la relación de unión entre ZEB1, miR-148a y el factor de crecimiento de fibroblastos 7 (FGF7).

Resultados: En comparación con los tejidos normales, el miR-148a se sobreexpresó en los tejidos de piel AA, mientras que el FGF7 se expresó de forma reducida. Los ensayos de función mostraron que la inhibición del miR-148a podría promover la proliferación de células DP y suprimir la apoptosis celular, mientras que la sobreexpresión del miR-148a mostró los efectos opuestos. El FGF7 se identificó como una gen diana del miR-148a. Posteriormente demostramos que la sobreexpresión del FGF7 aceleró la proliferación de células DP y suprimió la apoptosis celular, que se eliminaron mediante el tratamiento con RWJ64809 (inhibidor de la proteína quinasa activada por mitógenos (MAPK)).
Además, el silenciamiento del FGF7 o el tratamiento con RWJ64809 anularon los efectos de la inhibición del miR-148a en las actividades celulares de las células DP. Finalmente, resultó que ZEB1 inhibió transcripcionalmente la expresión del miR-148a.

Conclusión: MiR-148a podría tener un gran potencial como objetivo terapéutico para AA, ya que la inhibición de miR-148a inducida por ZEB1 facilitó la proliferación de células DP y suprimió la apoptosis durante la progresión de AA a través de la activación de la vía de señalización MAPK regulando la expresión de FGF7.