Revista de técnicas analíticas y bioanalíticas

Abstracto

Cuantificación del análogo de insulina glargina y sus dos metabolitos M1 y M2 en sistemas LC-MS/MS Triple Quad 6500 y Triple TOF 5600 en un estudio toxicocinético canino

Yong-Xi Li, Yan Ke, Junyu Li, Yu Li, Run Li, Xiaofeng Chen, Sahana Mollah y Xu Wang

La glargina es un análogo de insulina de bioingeniería de larga duración que se utiliza comúnmente en el tratamiento médico de la diabetes mellitus dependiente de insulina. Después de la inyección subcutánea, la glargina sufre un proceso enzimático que genera dos metabolitos, M1 y M2. Las evidencias cuantitativas de su presencia y concentración después de la administración de múltiples concentraciones son importantes para el estudio clínico. Dicha información también puede ayudar a comprender la farmacocinética, la farmacodinámica y la toxicología durante el desarrollo de fármacos insulínicos. Desarrollamos y validamos un método analítico de alto rendimiento acoplado con extracción en fase sólida (SPE) y LC-MS/MS para la cuantificación de insulina intacta en muestras de plasma para su uso en estudios preclínicos y clínicos. Los experimentos de monitoreo de reacciones múltiples (MRM) realizados en un instrumento de espectrometría de masas triple-cuádruple se utilizaron para la cuantificación. Se desarrolló un método UHPLC de 3,5 min para lograr un alto rendimiento. Se construyó una curva de calibración estándar de ocho puntos con una concentración de 0,2 ng/mL a 20 ng/mL correspondiente a los niveles normales de insulina en plasma sin ayuno. Los criterios de aceptación para los valores de exactitud, precisión y linealidad de la curva de cuantificación se desarrollaron de acuerdo con la guía de validación del método bioanalítico publicada por la Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) y la Agencia Europea de Medicamentos (EMA). Este método MRM validado se aplicó para el estudio de toxicidad de análogos de insulina en perros. Se informaron los resultados toxicocinéticos. Además, comparamos los resultados de MRM con los resultados de cuantificación MS adquiridos en un tiempo de vuelo cuádruple-cuádruple híbrido (QqTOF) y demostramos que el instrumento de alta resolución puede ser una opción para la cuantificación de péptidos y proteínas bioterapéuticas.