Biología celular y molecular

Abstracto

El silenciamiento del gen MRP7 mediante ARNi revirtió la resistencia a múltiples fármacos en la línea celular resistente al carcinoma hepatocelular HepG2/ADM y SMMC7721/ADM

Qing Chen, Fan Hu, Fan Zhang, Jie Zhou

Objetivo: Investigar el efecto del silenciamiento del gen MRP7 mediante ARNi sobre la resistencia a múltiples fármacos en la línea celular resistente al carcinoma hepatocelular SMMC7721/ADM y HepG2/ADM.

Métodos: Las células SMMC7721 y HepG2 se transfectaron con diferentes concentraciones de gradiente de doxorrubicina (ADM) para producir HepG2/ADM y SMMC7721/ADM. El ARNi-MRP7 se transfectó en células HepG2/ADM y SMMC7721/ADM mediante liposomas de lipofectamina 2000. Se utilizó RT-PCR cuantitativa fluorescente en tiempo real para detectar la expresión de ARNm de MRP7 en cada grupo. Se utilizó Western blot para detectar la expresión de la proteína MRP7. Se utilizaron el ensayo de invasión Transwell y la citometría de flujo para detectar la influencia en la capacidad de invasión y la apoptosis de las células de hepatoma después de silenciar el gen MRP7.

Resultados: El ensayo MTT reveló que los valores de IC50 y RI de las células SMMC7721/ADM y HepG2/ADM disminuyeron después del tratamiento con siRNA. La expresión de ARNm de MRP7 disminuyó significativamente en las células SMMC7721/ADM y HepG2/ADM después de la transfección con siRNA. En comparación con la expresión de las células parentales, las expresiones de la proteína MRP7 aparentemente disminuyeron en las células SMMC7721/ADM y HepG2/ADM. La citometría de flujo mostró que el silenciamiento del gen MRP7 puede resultar en una tasa significativamente mayor de apoptosis de las células HepG2/ADM y SMMC7721/ADM. Los ensayos Transwell mostraron que el silenciamiento del gen MRP7 redujo significativamente el potencial invasivo de las células SMMC7721/ADM y HepG2/ADM.

Conclusión: Después de silenciar el gen MRP7 en células SMMC7721/ADM y HepG2/ADM mediante ARNi, la sensibilidad de las células a los fármacos quimioterapéuticos aumentó significativamente y puede revertir parcialmente la resistencia de las células a los fármacos quimioterapéuticos.