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La terapia fotodinámica (TFD) es un procedimiento clínicamente aprobado para el tratamiento de enfermedades caracterizadas por una proliferación celular descontrolada, en particular el cáncer. Implica la administración de un fotosensibilizador (PS) que puede producir especies reactivas de oxígeno (ROS) al irradiarse con luz, lo que conduce a la eliminación selectiva de células neoplásicas. Un desafío importante en la TFD es el desarrollo de nuevos PS y sistemas de administración de fármacos que mejoren la eficacia y la selectividad de la terapia. Para tener éxito en la detección de fármacos, es crucial utilizar sistemas celulares que reproduzcan con precisión el fenotipo del tejido diana para obtener datos biomédicos confiables que se correlacionen con las pruebas in vivo. De esta manera, los cultivos tridimensionales (3D) son particularmente atractivos ya que integran señales químicas y mecánicas que surgen de la matriz extracelular (ECM) y las células adyacentes. Es importante destacar que los modelos 3D pueden imitar el patrón de expresión génica in vivo y los gradientes moleculares. Estas características afectan significativamente el resultado de la TFD, lo que mejora el poder predictivo de los modelos 3D. Por lo tanto, la investigación en PDT debe basarse en la explotación de esta tercera dimensión, garantizando un diseño personalizado en función del tejido a modelar, una fácil aplicabilidad y reproducibilidad. La revisión resume los avances en esta área emergente.