Revista de obesidad y metabolismo

Abstracto

Administración de la proteína inhibidora b-ZIP a células 3T3-L1 para estudiar el proceso de diferenciación de preadipocitos ligado al tiempo

Nishtha Sharma

Un estudio exhaustivo de los factores de transcripción implicados en la diferenciación de los preadipocitos permitiría manipular la fisiología de los adipocitos y el número de células, lo que ayudaría a controlar la obesidad y las morbilidades relacionadas. Las cremalleras de leucina básicas (b-ZIP) son una clase eucariota de factores de transcripción (TF) que tienen funciones fundamentales en varios procesos, incluida la regulación del crecimiento y la diferenciación celular. Las proteínas de unión al potenciador de CCAAT (C/EBP) son una familia de TF b-ZIP que regulan la diferenciación de los adipocitos. La inducción hormonal de los preadipocitos 3T3-L1 conduce a la expresión de la proteína de unión al potenciador de CCAAT C/EBP β y C/EBP δ. Estos factores de transcripción inducen además la expresión de C/EBP α, que junto con PPARγ, activa todos los genes específicos de los adipocitos. Un AC/EBP negativo dominante diseñado que posee una cremallera de leucina pero carece de dominios de transactivación y unión al ADN funcionales, forma heterodímeros inactivos estables con C/EBP in vitro e inhibe la diferenciación de células 3T3. En este estudio, la administración de proteína AC/EBP expresada y purificada con Lipofectamina 2000 durante unas horas da como resultado una menor acumulación de lípidos en células diferenciadas en comparación con las células transfectadas con el gen AC/EBP. El análisis de la expresión génica de genes específicos de adipocitos y el Western blotting de proteínas diana han demostrado la degradación de genes diana en pocas horas después de la transfección de proteínas. La PCR ChIP ha proporcionado evidencias de una menor unión de C/EBPβ a la región promotora de genes marcadores de adipocitos en células transfectadas.