Investigación sobre el arroz: acceso abierto

Abstracto

Evaluación de los factores que afectan la transformación del arroz Indica mediada por Agrobacterium de IR58025B: una línea de mantenimiento público

Huaping Gui, Xia Li, Yubo Liu y Xianggan Li

En este estudio, informamos sobre nuestros esfuerzos para desarrollar un protocolo de transformación eficiente mediado por Agrobacterium para la transformación del arroz Indica IR58025B con manosa como agente de selección. Se optimizaron sistemáticamente varios factores, como el medio basal, la temperatura de cultivo, las cepas para la infección, la duración del secado al aire de los callos después de la infección y la concentración de sal del medio de cocultivo, de modo que la frecuencia de transformación (TF) más alta alcanzara el 74%. Alrededor del 94% de los embriones maduros fueron inducidos a generar callos de alta calidad en medio NB modificado. Tanto la cantidad como la calidad de los callos mejoraron cuando se indujo el callo a partir de embriones sin endospermo en comparación con semillas maduras intactas. La temperatura más alta (32 °C) mostró mejoras en comparación con las temperaturas más bajas (25 °C y 28 °C) tanto para la inducción de callos como para la transformación. Las cepas de Agrobacterium de EHA105 produjeron la mejor TF en comparación con EHA101, LBA4404 y AGL1. Sin embargo, LBA4404 produjo la frecuencia de copia única más alta. Antes del cocultivo, se realizó un secado al aire de los callos inoculados en una campana de flujo laminar durante 4 a 7 horas y se produjo un TF más alto. Una concentración de sal más baja para el medio de cocultivo mejoró tanto la entrega de ADN como el TF.